賽默飛世爾科技 Applied Biosystems 7500 實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的詳細(xì)介紹、核心參數(shù)和說明書指南。是賽默飛世爾科技經(jīng)典的中通量qPCR儀器。它以其可靠性、精確性和易用性而聞名，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析（定量）、病原體檢測(cè)、SNP基因分型、microRNA分析等多種生命科學(xué)研究領(lǐng)域。它的核心特點(diǎn)是采用基于濾光片的光學(xué)系統(tǒng)，能夠提供穩(wěn)定且可重復(fù)的檢測(cè)結(jié)果。

一、賽默飛7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR核心特點(diǎn)

1、可靠的性能：

基于濾光片的系統(tǒng)： 為每種熒光染料配備專用的激發(fā)和發(fā)射濾光片，光路效率高，信號(hào)強(qiáng)，靈敏度高。

精密的溫控控制： 半導(dǎo)體熱電溫控模塊，保證升降溫快速、準(zhǔn)確，孔間溫度均一性好，確保擴(kuò)增效率。

2、靈活的檢測(cè)能力：

支持5色熒光檢測(cè)，允許在同一反應(yīng)孔中進(jìn)行多重檢測(cè)（例如，一個(gè)目標(biāo)基因、一個(gè)內(nèi)參基因和ROX參比染料）。

3、直觀的軟件：

配備 “7500 Software v2.3" 或更高版本，界面友好，引導(dǎo)式工作流程，即使是新手也能快速上手。軟件內(nèi)置了實(shí)驗(yàn)設(shè)置、數(shù)據(jù)采集和結(jié)果分析功能。

4、廣泛的應(yīng)用支持：

兼容多種化學(xué)試劑，包括：SYBR Green I、TaqMan探針、Molecular Beacons等，適用于各種復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

二、賽默飛7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR核心參數(shù)

熱循環(huán)系統(tǒng)：珀耳帖效應(yīng)系統(tǒng)

加熱塊規(guī)格：96孔加熱塊

可選耗材：96孔反應(yīng)板與光學(xué)蓋膜/96孔反應(yīng)板與光學(xué)平蓋/0.1mL 8連管與光學(xué)平蓋

支持容量：10-30μL

樣本升降溫速率：快速模式：±3.5℃/秒

標(biāo)準(zhǔn)模式：±1.6℃/秒

9600模式：－1.6-＋0.8℃/秒

加熱塊極限升降溫速率：5.5℃/秒

溫度范圍：4℃-100℃

溫度精度：設(shè)置值/顯示溫度的±0.25℃(35℃至95℃)(時(shí)鐘啟動(dòng)后3分鐘開始測(cè)量)

溫度均一性：±0.5℃(35℃至95℃)(時(shí)鐘啟動(dòng)后30秒開始測(cè)量)

光學(xué)系統(tǒng)：五色激發(fā)光濾光片，五色發(fā)射光濾光片和CCD成像系統(tǒng)

安裝時(shí)已校準(zhǔn)染料：SYBR Green I, FAM , VIC , JOE , NED , TAMRA , ROX ,Texas Red, Cy3 , Cy5

被動(dòng)參照染料：ROX

數(shù)據(jù)采集：對(duì)所有反應(yīng)孔收集的所有五色濾片的數(shù)據(jù)（無論何種反應(yīng)板設(shè)置），試驗(yàn)結(jié)束后反應(yīng)板設(shè)置可修改。

定量PCR運(yùn)行時(shí)間：快速模式不超過2小時(shí)

快速模式不超過40分鐘

軟件：應(yīng)用軟件（基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線、基于比較Ct值的相對(duì)定量、融解曲線分析、存在/不存在、基于或非基于實(shí)時(shí)擴(kuò)增的基因分型）

引物分析軟件（用于客戶自行設(shè)計(jì)引物和探針）

尺寸（寬×深×高）：34×45×49cm

重量：34kg

三、重要注意事項(xiàng)

1、校準(zhǔn)： 儀器需要定期進(jìn)行光學(xué)校準(zhǔn)（尤其是更換燈泡或進(jìn)行重大維修后），以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。請(qǐng)遵循用戶手冊(cè)中的校準(zhǔn)流程。

2、維護(hù)： 定期清潔樣品槽和光學(xué)蓋板，防止灰塵和污染物影響光學(xué)信號(hào)。

3、數(shù)據(jù)備份： 定期備份您的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和儀器設(shè)置文件。

四、總結(jié)

賽默飛Applied Biosystems 7500是一款非常成熟和穩(wěn)健的實(shí)時(shí)熒光定量PCR平臺(tái)。它的5色濾光片系統(tǒng)在多重檢測(cè)應(yīng)用中表現(xiàn)出色，其穩(wěn)定的性能使其成為許多分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的“主力"設(shè)備。

如果您在尋找具體操作步驟（如如何創(chuàng)建新實(shí)驗(yàn)、設(shè)置基線/閾值、運(yùn)行熔解曲線分析等），強(qiáng)烈建議您直接查閱儀器電腦上的幫助文檔或提供的用戶手冊(cè)。