伯樂(lè)（Bio-Rad）的CFX Opus Deepwell實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)是一款高性能、高通量的96孔深孔板qPCR儀。要讓它順利運(yùn)行，您需要搭配以下幾類(lèi)試劑和耗材：

一、伯樂(lè)CFX Opus Deepwell實(shí)時(shí)熒光定量PCR核心試劑：qPCR預(yù)混試劑

這是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)最關(guān)鍵的化學(xué)物質(zhì)，通常包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等。您需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型選擇：

1、探針?lè)A(yù)混液：

特點(diǎn)：特異性高，適合多重檢測(cè)。需要設(shè)計(jì)并合成熒光標(biāo)記的探針（如TaqMan探針）。

伯樂(lè)推薦：SsoAdvanced™ Universal Probes Supermix

其他通用品牌：TaKaRa、Thermo Fisher、Qiagen等公司的探針?lè)A(yù)混液也兼容。

2、染料法預(yù)混液：

特點(diǎn)：成本較低，使用方便，無(wú)需設(shè)計(jì)探針。染料（如SYBR Green I）會(huì)與所有雙鏈DNA結(jié)合發(fā)出熒光。

伯樂(lè)推薦：SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix

其他通用品牌：同樣，市面上主流的SYBR Green預(yù)混液基本都可以在該儀器上使用。

3、一步法RT-qPCR預(yù)混液：

特點(diǎn)：如果您是從RNA直接進(jìn)行定量PCR，需要這種試劑。它將逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)整合在同一個(gè)管中進(jìn)行。

伯樂(lè)推薦：iScript? One-Step RT-PCR Kit with SYBR? Green 或 iTaq? Universal Probes One-Step Kit

選擇建議：伯樂(lè)自家的預(yù)混液經(jīng)過(guò)優(yōu)化，兼容性好，但儀器也開(kāi)放，支持第三方試劑。您可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的靈敏度、特異性要求和預(yù)算進(jìn)行選擇。

二、伯樂(lè)CFX Opus Deepwell實(shí)時(shí)熒光定量PCR核心耗材

這部分是直接與儀器和樣品接觸的物理組件。

1、qPCR板：

類(lèi)型：必須使用96孔深孔板。CFX Opus Deepwell型號(hào)的加熱塊是為深孔板設(shè)計(jì)的，與標(biāo)準(zhǔn)板不兼容。

規(guī)格：常見(jiàn)的容積有0.2 mL。

材質(zhì)：推薦使用聚丙烯材質(zhì)的硬板，光學(xué)性能好，導(dǎo)熱均勻。

封膜：板子需要配合專(zhuān)用的封板膜使用。

2、封板膜：

光學(xué)透明封板膜：這是常用的類(lèi)型，必須確保其光學(xué)性能優(yōu)異，不會(huì)在qPCR的熒光通道產(chǎn)生自發(fā)熒光。

伯樂(lè)推薦：Microseal ‘B’ Seal, 光學(xué)透明封板膜。這是伯樂(lè)儀器的標(biāo)準(zhǔn)配置，兼容性良好。

其他品牌：其他公司生產(chǎn)的適用于96孔深孔板的光學(xué)透明封板膜也可以使用，但務(wù)必確認(rèn)其光學(xué)性能和粘合性。

三、輔助耗材與工具

1、八聯(lián)管和管蓋：

如果您不想使用整板，也可以使用獨(dú)立的0.2 mL 八聯(lián)管及對(duì)應(yīng)的平蓋或凸蓋。同樣需要確保是深孔規(guī)格。

使用八聯(lián)管時(shí)，需要將它們正確地放置在儀器的96孔板架上。

2、移液器及吸頭：

移液器：需要覆蓋從微升級(jí)到毫升級(jí)的精確移液。

帶濾芯的吸頭：強(qiáng)烈推薦使用，尤其是在處理RNA或進(jìn)行高靈敏度實(shí)驗(yàn)時(shí)，可以防止氣溶膠污染和交叉污染。

多通道移液器：可以大大提高在96孔板中加樣的效率。

四、總結(jié)

1、qPCR預(yù)混液

推薦品牌/型號(hào)：Bio-Rad: SsoAdvanced™ 系列 根據(jù)探針?lè)?染料法選擇。其他： TaKaRa, Thermo Fisher, Qiagen等。

2、一步法RT-qPCR試劑

Bio-Rad: iScript™ 或 iTaq™ One-Step系列，用于RNA模板。

3、96孔深孔板

Bio-Rad: Hard-Shell? 96-Well PCR Plates (深孔)，必須是深孔板

。

4、光學(xué)透明封板膜

Bio-Rad: Microseal ‘B’ Seal，密封性好，無(wú)熒光干擾。

5、八聯(lián)管及管蓋

Bio-Rad或其他品牌的0.2 mL深孔八聯(lián)管，可選，用于非整板實(shí)驗(yàn)。