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技術文章

biorad伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR儀實驗中需要使用到的耗材和試劑

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伯樂Bio-Rad CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀實驗所需的耗材和試劑。這臺儀器是qPCR實驗的核心設備,要完成一個完整的實驗,需要以下一系列的耗材和試劑。我們可以將其分為三大部分:核心耗材、實驗試劑、輔助耗材。


一、伯樂CFX OPUS96實時熒光定量PCR儀核心耗材

這些是直接用于儀器運行和信號檢測的消耗品。

1、qPCR反應板/八聯管

(1)96孔光學反應板:這是常用的耗材,專為CFX Opus 96的光學系統設計。板子必須是光學平蓋或使用光學封板膜,以確保激光能準確激發熒光并接收信號。

(2)透明封板膜:用于密封96孔板,防止實驗過程中液體蒸發和交叉污染。務必選擇與您的儀器兼容的高質量封板膜。

(3)八聯管與管蓋:如果您不想使用整塊板,也可以使用獨立的八聯管和相應的透明管蓋。這對于優化反應條件或樣本量少時非常方便。

重要提示:伯樂儀器對耗材有優化建議。使用伯樂原廠或推薦品牌的耗材可以獲得良好的光學性能和熱傳導效率。

2、校準板

CFX Opus 96通常需要一塊光學校準板。這臺儀器在出廠時已校準,但根據實驗室標準操作程序,可能需要定期或在移動儀器后進行校準。請參考儀器手冊確認您是否需要以及何時需要使用。


二、伯樂CFX OPUS96實時熒光定量PCR儀實驗試劑

這些是進行qPCR化學反應所必需的生化成分。

1、PCR預混液

這是核心試劑,通常以2x濃度的形式提供,包含了進行高效、特異性PCR擴增所需的所有成分(除了引物、探針和模板DNA/cDNA)。

(1)主要成分包括:

熱啟動DNA聚合酶:提高反應特異性和靈敏度。

dNTPs:合成DNA的原料。

MgCl?:聚合酶必需的輔因子。

緩沖鹽:提供良好的反應pH環境。

穩定劑和增強劑。

(2)選擇類型:

SYBR Green預混液:適用于使用SYBR Green染料法進行實驗。染料會嵌入所有雙鏈DNA中發出熒光。

TaqMan探針預混液:適用于使用水解探針法(如TaqMan)進行實驗。這種預混液針對探針法的5‘-3’外切酶活性進行了優化。

2、物和探針

(1)引物:一對特異性引物,用于擴增您的目標基因。

對于SYBR Green法,只需要一對引物。對于TaqMan探針法,除了引物,還需要一條熒光標記的探針。

(2)探針:通常是兩端分別標記有報告熒光基團和淬滅基團的寡核苷酸探針。

3、模板核酸

(1)DNA:用于基因分型或病原體檢測。

(2)cDNA:由RNA經過逆轉錄 反應合成,用于基因表達分析。

4、無核酸酶水

用于稀釋和配制反應體系,確保不會引入外源核酸酶降解您的試劑和樣本。

5、陽性對照和陰性對照

(1)陽性對照:含有已知目標序列的模板,用于驗證整個實驗體系的有效性。

(2)無模板對照:用水代替模板,用于檢測試劑或環境中是否存在污染。

6、標準品

如果您需要進行定量,則需要一系列已知濃度的標準品(例如,含有目標基因的質粒DNA或合成寡核苷酸梯度稀釋液),用于制作標準曲線。


三、輔助耗材與工具

這些是實驗準備過程中物品。

1、移液器和無菌帶濾芯吸頭:用于精確移取液體,帶濾芯的吸頭可以防止氣溶膠污染和交叉污染。

2、渦旋混合儀和微型離心機:用于混勻試劑和離心收集管壁上的液滴。

3、冰盒:用于在準備反應時保持試劑的低溫狀態。

4、無塵紙/酒精:用于清潔工作臺面,防止污染。

TEL:18016231680

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